本篇文章给大家谈谈tlc和硅胶柱层析，以及硅胶柱层析使用的仪器有哪些对应的知识点，希望对各位有所帮助，不要忘了收藏本站喔。
本文目录一览：
- 1、硅胶柱层析
- 2、层析柱原理和使用方法
- 3、TLC用的硅胶颗粒与层析柱用的硅胶颗粒有什么不同?
- 4、柱层析的三,上样方法
- 5、请问做柱层析的硅胶怎么做预处理啊,怎么装柱
- 6、硅胶柱层析的溶液要收集到管内溶液流完吗
硅胶柱层析
硅胶层析法的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而得到分离，一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附，极性较弱的物质不易被硅胶吸附，整个层析过程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸过程。
依据样品中各组分的极性大小。由于硅胶表面的硅羟基（SiOH）或其他极性基团极性较强，因此，分离的次序是依据样品中各组分的极性大小，即极性较弱的组份最先被冲洗出色谱柱。
原因是柱层析硅胶浓缩之前没有活性炭脱色导致。解决方法：装载柱子里用甲醇洗脱一下，再取出来。烘干活化就可以了。
柱层析分离的注意事项 装柱子时从下往上装，先塞棉花，这个主要是为了不漏石英砂和硅胶。然后倒入石英砂，到图示那么多就可以了，主要是为了填补柱子下面的空间，让硅胶柱是一个上下面粗细一致的圆柱形。
层析柱原理和使用方法
1、柱层析技术又称柱色谱技术，主要原理是根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同，经多次反复分配将组分分离开来。柱层析操作时，先在圆柱管中填充不溶性基质，形成一个固定相。
2、柱层析原理：柱层析法的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而使各组分分离。一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附，极性较弱的物质不易被硅胶吸附。
3、方法：将某一类细胞中所有的蛋白质过含有该类细胞各种片段的DNA层析柱，用低浓度盐溶液洗去不与DNA作用的绝大多数蛋白，用中浓度盐溶液洗脱大部分与能DNA相互作用的蛋白。
TLC用的硅胶颗粒与层析柱用的硅胶颗粒有什么不同?
它们的主要成分都为二氧化硅，但是一般说到硅胶主要就是说柱层层析硅胶和薄层层析硅胶。柱层层析硅胶是走柱子用的分为试剂级、工业级。具有一定孔结构。
硅胶是一种高活性吸附材料，属非晶态物质，其化学分子式为mSiO2·nH2O。不溶于水和任何溶剂，无毒无味，化学性质稳定，除强碱、氢氟酸外不与任何物质发生反应。各种型号的硅胶因其制造方法不同而形成不同的微孔结构。
不论干法还是湿法，硅胶（固定相）的上表面一定要平整，并且硅胶（固定相）的高度一般为15cm左右，太短了可能分离效果不好，太长了也会由于扩散或拖尾导致分离效果不好。
柱层析的三,上样方法
柱层析过程中常用的两种上样方法。两者无太大区别，但各有千秋：干法上样要求待分离物要与硅胶充分混合，所以制样的时候要完全溶解，加硅胶后要尽量旋干。上样简单很多，只要均匀地铺满一层不要太厚就可以。
无论走常压柱或加压柱，都应进行这一步，可使分离度提高很多，且可以避免过柱时由于柱床萎缩产生开裂。上样。干法湿法都可以。海沙是没必要的。上样后，加入一些洗脱剂，再将一团脱脂棉塞至接近硅胶表面。
装柱子（添硅胶）时，有两种方法：即湿法装柱和干法装柱，二者各有优劣。
柱层析的基本操作过程：主要包括常压分离、减压分离和加压分离 3种模式。常压分离是最简单的分离模式方便、简单 ，但是洗脱时间长。
吸附层析 吸附柱层析 吸附柱层析是以固体吸附剂为固定相，以有机溶剂或缓冲液为流动相构成柱的一种层析方法。
柱层析分离的注意事项 装柱子时从下往上装，先塞棉花，这个主要是为了不漏石英砂和硅胶。然后倒入石英砂，到图示那么多就可以了，主要是为了填补柱子下面的空间，让硅胶柱是一个上下面粗细一致的圆柱形。
请问做柱层析的硅胶怎么做预处理啊,怎么装柱
1、湿法装柱是先把硅胶用适当的溶剂拌匀后，再填入柱子中，然后再加压用淋洗剂走柱子，本法最大的优点是一般柱子装的比较结实，没有气泡。
2、干法装柱：将硅胶通过漏斗装入柱内，中间不应间断，形成一细流慢慢加入管内。也可用橡皮槌轻轻敲打柱硅胶柱使硅胶装填连续均匀、紧密。柱装好后，打开下端活塞，然后倒入洗脱剂洗脱以排尽柱内空气，并保持一定液面。
3、装柱。将柱底用棉花塞紧，不必用海沙，加入约1/3体积石油醚（氯仿），装上蓄液球，打开柱下活塞，将匀浆一次倾入蓄液球内。随着沉降，会有一些硅胶沾在蓄液球内，用石油醚（氯仿）将其冲入柱中。压实。
4、装柱：将柱底用棉花塞紧，不必用海沙，加入约1/3体积石油醚（氯仿），装上蓄液球，打开柱下活塞，将匀浆一次倾入蓄液球内。随着沉降，会有一些硅胶沾在蓄液球内，用石油醚（氯仿）将其冲入柱中。
5、柱层析操作中要注意装柱、淋洗剂的选择及样品的收集、最后的处理。装柱：柱子下面的活塞不要涂润滑剂，会被淋洗剂带到产品中的，可以***用四氟节门的。
6、装柱方法分为湿法和干法，一般来说，湿法装柱的效果优于干法装柱。湿法装柱： 先将柱层析的填料活化处理后浸润在适宜的有机溶剂中，使之处于有机环境。
硅胶柱层析的溶液要收集到管内溶液流完吗
1、硅胶依靠重力和洗脱剂的带动，在柱内自由沉降，此间要不断把流出的洗脱剂加回柱内保持一定的液面，直至把硅胶加完并在柱内沉降不再变动为止。
2、柱层析操作时，先在圆柱管中填充不溶性基质，形成一个固定相。将样品加到柱子上，用特殊溶剂洗脱，溶剂组成流动相。
3、然后就可以放心地加入大量洗脱剂，而不会冲坏硅胶表面。过柱和收集。
4、上样完毕后，接着即用淋洗剂淋洗。淋洗剂一般***用TLC分析得到的展开剂的比例再稀释一倍后的溶剂。
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