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硅胶柱清洗方法
使用适当醇类溶剂,包括乙醇、异丙醇,将硅胶柱反复进行溶剂洗涤。制备中性的缓冲液,进行硅胶柱洗涤,中和酸性或碱性残留物质。使用反相液相色谱柱洗涤,将离子性物质洗净。
C18反相硅胶的预处理很简单,就是用甲醇浸泡即可。使用的时候,将C18 反相硅胶用甲醇混匀,搅拌,可以稍微超声脱气泡但不可时间太长,5分钟吧。
至于柱子的清洗,可以用正己烷来试试——你要确定是用的硅胶柱正相洗脱,而不是键合相硅胶柱反相洗脱。另外,不明白为什么要加三乙胺,一般都用正己烷-异丙醇,梯度洗脱。
空气会影响试验分离时间和效果)。一般方法是加入二氯甲烷等试验试剂,后用橡皮球在注入段将清洗试验试剂挤压吹出,重复多次即可。还有,硅胶会吸水,注入清洗试验试可以防止吸水。
柱层层析硅胶的简介
柱层层析硅胶为白色均匀颗粒,主要成分为二氧化硅。具有纯度高,安全卫生之特点。是具有固体特性的胶态体系,由形成凝集结构的胶体粒子构成。胶体粒子是水合状态硅胶(多硅酸)的缩聚物,属非晶态物质。
柱层析硅胶又称为层析介质,产品是以优质硅胶为原料,经精细加工处理制备成的具有一定粒度分布范围、高纯度白色粉末。广泛用于医药、化工、植提、生化等行业。
柱层层析硅胶是一种强极性固体吸附剂,化学性质稳定、孔分布均匀、承载力强,其主要成分为二氧化硅,以孔结构均匀的优质硅胶为原料加工制备而成。
柱层析法的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而使各组分分离。一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附,极性较弱的物质不易被硅胶吸附。
柱层析硅胶选取优质硅胶为原料加工制成。柱层析硅胶为白色均匀颗粒,主要成分为二氧化硅。
色谱硅胶的孔径及用途
活化后的硅胶常用于干凝胶。硅胶的分子式为SiO2·nH2O是一种坚硬无定型链状和网状结构的硅酸聚合物颗粒。
Hypersil 填料是基于粒度为3um 、5um和10um, 孔径为120A的硅胶为基质的HPLC填料其生产过程的质量控制标准非常严格全世界数千个实验室使用Hypersil色谱柱已长达20多年很多应用实例可以从多种文献及著名杂志上查到。
主要用途:电子防潮,显色指示 孔径:细孔硅胶 规格:大概分为4种规格,分别是:1-3mm;2-4mm;2-5mm;4-8mm。
硅胶300-400目和薄层层析硅胶哪个分离效果好呢?
1、薄层层析硅胶板的优点是分离效果好,塔极数高,点样斑点小,便于系列分析,分离时间短,灵敏度高,斑点清晰,不扩散。
2、薄层层析的硅胶粒度是10-40μ;分为硅胶H, G ,GF254共三种品种,最常用的是硅胶H,硅胶GF254;通常我们可以买这种硅胶来自己铺制备板。就是自己铺的没有买来的效果好一些,但是也将就 呵呵。
3、硅胶目数越大,粒径越小,比表面积大,吸附能力强,分离较慢,分离效果好。相反,目数小,粒径大,比表面积小,吸附能力弱,分离较快,分离效果差。
4、没用过300-400目的。建议二:过完柱的产品,浓缩后,可以用脱脂棉过滤一下,我们以前这样试过,效果还不错。
怎么做硅胶柱层析分离?
装柱子过程不在这里赘述,装好柱子后,上样品,注意用吸管小心翼翼,沿着柱壁绕圈,均匀上样,尽量不要弄坏硅胶表面。样品倒入后,让样品靠重力完全渗入硅胶,最后再随意倒入一些石英砂在最上面。
干法装柱:将硅胶通过漏斗装入柱内,中间不应间断,形成一细流慢慢加入管内。也可用橡皮槌轻轻敲打柱硅胶柱使硅胶装填连续均匀、紧密。柱装好后,打开下端活塞,然后倒入洗脱剂洗脱以排尽柱内空气,并保持一定液面。
装柱。将柱底用棉花塞紧,不必用海沙,加入约1/3体积石油醚(氯仿),装上蓄液球,打开柱下活塞,将匀浆一次倾入蓄液球内。随着沉降,会有一些硅胶沾在蓄液球内,用石油醚(氯仿)将其冲入柱中。 压实。
无论走常压柱或加压柱,都应进行这一步,可使分离度提高很多,且可以避免过柱时由于柱床萎缩产生开裂。上样。干法湿法都可以。海沙是没必要的。上样后,加入一些洗脱剂,再将一团脱脂棉塞至接近硅胶表面。
什么是硅胶柱层析?
柱层析硅胶又称为层析介质,产品是以优质硅胶为原料,经精细加工处理制备成的具有一定粒度分布范围、高纯度白色粉末。广泛用于医药、化工、植提、生化等行业。
柱层层析硅胶为白色均匀颗粒,主要成分为二氧化硅。具有纯度高,安全卫生之特点。是具有固体特性的胶态体系,由形成凝集结构的胶体粒子构成。胶体粒子是水合状态硅胶(多硅酸)的缩聚物,属非晶态物质。
常说的过柱子应该叫柱层析分离,也叫柱色谱,具体原理和方法如下:柱层析原理:柱层析法的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而使各组分分离。一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附,极性较弱的物质不易被硅胶吸附。
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