大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于硅胶柱原理的问题,于是小编就整理了3个相关介绍硅胶柱原理的解答,让我们一起看看吧。
柱层析法的原理?
柱层析原理:
柱层析法的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而使各组分分离。一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附,极性较弱的物质不易被硅胶吸附。当***用溶剂洗脱时,发生一系列吸附→解吸→再吸附→再解吸的过程,吸附力较强的组分,移动的距离小,后出柱;吸附力较弱的组分,移动的距离大,先出柱。
硅胶柱层析流动相:
极性小的用乙酸乙酯:石油醚系统;极性较大的用甲醇:氯仿系统;极性大的用甲醇:水:正丁醇:醋酸系统;拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸
一般都是利用极性相似相容原理,看流动相与固定相的极性,大部分是固定相的极性小于流动相,然后流动相的极性与所要洗脱的物质极性比较接近,从而将物质洗脱下来。
为什么过硅胶柱要用大极性的洗脱剂?
因为根据物质结构相似相溶原理,极性大的物质溶于极性大的溶剂,极性大的溶剂易取代被吸附的物质。因此极性大的组分要用极性大的溶剂才能洗脱下来。若用极性小的溶剂则难以洗脱。
洗脱剂的主要功能是溶解性能,若极性大的组分和洗脱剂(溶剂)微粒间相互作用和原先溶质微粒间、溶剂微粒间作用相近,则溶解的就会较多.这应当是相似相溶规律的基础,但是上述规律并不方便判断。于是人们总结出一个简易判断的规律:相似相溶规律通常的说法是“极性相似的两者互溶度大”。
HIC色谱柱原理?
色谱柱填料可以由基质直接构成,如硅胶、氧化铝、高交联度的苯乙烯-二乙烯苯或者甲基丙烯酸酯等等;也可以在这些基质的基础上涂布或化学键合固定液来构成,如:最经典的各种ODS柱、氨基柱、氰基柱等。
疏水作用色谱(HIC)
疏水作用色谱的原理是在高离子强度的条件下,蛋白质溶解度降低,易吸附在中等疏水性的填料表面。随着离子强度的降低,蛋白质的溶解度增加,逐步从柱子上洗脱下来。该法具有高分辨率及保持蛋白质生物活性的特点。
到此,以上就是小编对于硅胶柱原理的问题就介绍到这了,希望介绍关于硅胶柱原理的3点解答对大家有用。