今天给各位分享快速硅胶制备柱样品的知识,其中也会对如何制备硅胶胶体进行解释,如果能碰巧解决你现在面临的问题,别忘了关注本站,现在开始吧!
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制板时,为什么要先将硅胶搅拌30分钟以上
无机硅胶最主要是运用于干燥剂、催化剂载体、消光剂、牙膏磨料等。硅胶产品的韧性、弹性都是非常好的,不会因外力作用而产生变形,且无毒无味无色,对人体没有危害。
取适量硅胶G(薄层色谱专用硅胶),与适量优质CMC混合均匀,不断搅拌,静置,再搅拌,反复进行此操作,使所有硅胶完全润湿,最后用超声波处理几分钟,充分排出溶液中的气泡,即可用于铺板。
避免表干里不干,或者固化不均匀的情况。硅胶原材料和固化剂要搅拌均匀,否则会出现表干里不干,或者固化不均匀的情况,出现这种情况会造成模具的报废,要尽力避免。
搅拌均匀很重要,否则会导致不固化,或者部分不固化的现象造成报废。由于加成型液体硅胶的操作时间只有30分钟,之后会开始变稠进入初步固化阶段,因此所有的操作要在30分钟内完成。
硅胶调配时应按不规则方向进行搅拌,使固化剂和硅胶充分混匀,尽量减少空气混入胶内,光滑产品最好在涂第一层胶时抽一次真空,真空度要求-0.1Mpa时保持7-8秒钟。硅胶配好后应及时制模。
怎么做硅胶柱层析分离?
1、装柱子过程不在这里赘述,装好柱子后,上样品,注意用吸管小心翼翼,沿着柱壁绕圈,均匀上样,尽量不要弄坏硅胶表面。样品倒入后,让样品靠重力完全渗入硅胶,最后再随意倒入一些石英砂在最上面。
2、干法装柱:将硅胶通过漏斗装入柱内,中间不应间断,形成一细流慢慢加入管内。也可用橡皮槌轻轻敲打柱硅胶柱使硅胶装填连续均匀、紧密。柱装好后,打开下端活塞,然后倒入洗脱剂洗脱以排尽柱内空气,并保持一定液面。
3、装柱。将柱底用棉花塞紧,不必用海沙,加入约1/3体积石油醚(氯仿),装上蓄液球,打开柱下活塞,将匀浆一次倾入蓄液球内。随着沉降,会有一些硅胶沾在蓄液球内,用石油醚(氯仿)将其冲入柱中。 压实。
硅胶层析的硅胶柱层析技术
硅胶柱层析原理硅胶层析法的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而得到分离, 一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附,极性较弱的物质不易被硅胶吸附,整个层析过程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸过程。
干法装柱:将硅胶通过漏斗装入柱内,中间不应间断,形成一细流慢慢加入管内。也可用橡皮槌轻轻敲打柱硅胶柱使硅胶装填连续均匀、紧密。柱装好后,打开下端活塞,然后倒入洗脱剂洗脱以排尽柱内空气,并保持一定液面。
将柱底用棉花塞紧,不必用海沙,加入约1/3体积石油醚(氯仿),装上蓄液球,打开柱下活塞,将匀浆一次倾入蓄液球内。随着沉降,会有一些硅胶沾在蓄液球内,用石油醚(氯仿)将其冲入柱中。压实。
装柱子过程不在这里赘述,装好柱子后,上样品,注意用吸管小心翼翼,沿着柱壁绕圈,均匀上样,尽量不要弄坏硅胶表面。样品倒入后,让样品靠重力完全渗入硅胶,最后再随意倒入一些石英砂在最上面。
制备纯化之上样量
当目标物和杂质分离度很好的情况下,我们就可以加大进样量即超载进样,随着进样量的增大,分离度变小,直至达到已经影响制备纯化得率和纯度要求。反之,如果分离度不好,就要酌情降低上样量来满足制备纯化得率和纯度要求。
进样量根据需要而定,一般10ul,20ul。当然跟浓度有关 分析测试百科网乐意为你解答实验中碰到的各种问题,祝你实验顺利,有问题可找我,百度上搜下就有。
孔梳子上的蛋白样品量推荐为**10-15ug**。但请注意,实际样品量还需根据您的实验目的和具体情况进行调整。例如,如果您想要检测的蛋白在样本中含量较低,那么可能需要增加样品量以提高检测灵敏度。
凝胶:上样量为柱体积的0.5-1%,不要超过2%,是物理方法,填料无吸附作用。要杂质与蛋白质分子量相差较大时才能有效分开。
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