大家好,今天小编关注到一个比较有意思的话题,就是关于硅胶柱色谱原理的问题,于是小编就整理了4个相关介绍硅胶柱色谱原理的解答,让我们一起看看吧。
硅胶柱色谱和凝胶柱色谱的区别?
主要区别在于填料类型、柱子大小、吸附(扩散)原理以及分离物质不同。
硅胶柱层析原理:硅胶层析法的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而得到分离, 一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附,极性较弱的物质不易被硅胶吸附,整个层析过程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸过程。
凝胶柱色谱也称为凝胶过滤色谱、分子筛色谱、凝胶渗透色谱(GPC)、排阻色谱。它主要是利用凝胶网状结构的分子筛作用,根据被分离物分子大小不同进行分离。具有的优点有分离条件温和,适用于不稳定的分子; 样品回收率高,几乎可达100%; 重复性高; 操作的时间相对较短,所需要的设备简单、经济
葡聚糖凝胶柱层析,其主要用于分离黄酮类化合物
HIC色谱柱原理?
色谱柱填料可以由基质直接构成,如硅胶、氧化铝、高交联度的苯乙烯-二乙烯苯或者甲基丙烯酸酯等等;也可以在这些基质的基础上涂布或化学键合固定液来构成,如:最经典的各种ODS柱、氨基柱、氰基柱等。
色谱硅胶的孔径及用途?
柱层析用的硅胶主要考虑的是粒径,一般用目数表示(单位面积上的筛孔数目,表示过筛用的筛子粗细),细的目数大,分离能力强(即比表面积大,吸附能力强),但洗脱速度慢,粗的则相反。 当然还跟硅胶的活度有关,即所含水分多少有关,含水太多,吸附力弱,需要活化,即高温烘烤,与TLC板的处理类似。 孔径指硅胶的表面孔径,当然表面孔径与比表面积有一定关系,对适合大小的分子有类似排阻色谱的作用,但这在柱层析里一般不考虑。 柱层析做的比较少,不知道表述是否正确,供参考。
层析柱原理和使用方法?
一,原理
柱层析操作时,先在圆柱管中填充不溶性基质,形成一个固定相。将样品加到柱子上,用特殊溶剂洗脱,溶剂组成流动相。在样品从柱子上洗脱下来的过程中,根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,经多次反复分配将组分分离。
柱层析法
二,使用方法
从天然产物中提取、分离和表征生物小分子,是新药研发中获得先导化合物的主要途径之一。层析法(Chromatography)是天然产物分离较为常用的方法之一。 层析法较早是根据化合物颜色分离一些植物色素,如今,层析法已经演变成为一种高度敏感的、有效的化合物分离和鉴定方法。柱层析一般包括常压柱层析、中压柱层析和高压柱层析。按照柱填料又可分为柱层析硅胶、离子交换层析、凝胶渗透色谱、疏水作用色谱等,其中以柱层析硅胶(正/反相)使用较为为广泛。与其他层析方法相比,柱层析具有操作简单,经济实惠 ,样品承载量大等优点,是天然产物分离纯化的方法之一。
层析柱是凝胶层析技术中的主体,一般用玻璃管或有机玻璃管。根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,从而分离的一种层析法。柱层析技术(chromatography) 又称柱色谱技术,主要原理是根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,经多次反复分配将组分分离开来。
使用方法如下:
1.吸附剂的处理及柱子装填:
将一定量薄层层析硅胶装入搪瓷盘置于烘箱中,于105。C活化2H后,取出放置室温即可装柱。柱子***用干法填充,填满整个柱体,不留死体积,密封后用柱塞式计量溶剂泵按丙酮一石油醚(5:95)比例泵入溶剂,至溶剂流出止。
2.上样:
将冬凌草的乙醇提取物400G用适量丙酮溶解,泵入中压柱柱头,然后泵入石油醚1000RID。
3.洗脱:
以一定比例的石油醚一丙酮为洗脱液,60ML/MIN的流速进行梯度洗脱,柱的使用压力为2~ 3KG/C 。按每份500ML收集,TLC检识展开剂丙酮一氯仿(2:8),显色剂5%香草醛浓硫酸乙醇液
至洗脱完全,相同流份合并,回收溶剂。将冬凌草甲素流份合并蒸干。加入适量甲醇热溶后自然放置,析出结晶,为冬凌草甲素。
4.层析柱再生、平衡:
到此,以上就是小编对于硅胶柱色谱原理的问题就介绍到这了,希望介绍关于硅胶柱色谱原理的4点解答对大家有用。